Caraterização fenotípica e genotípica de comunidades bacterianas da água do Rio Cuiabá

Autor: Karina Augusta Sarto

Categoria(s): Dissertações

Palavra(s)-chave: biologia molecular, diversidade, microbiologia ambiental

O Rio Cuiabá possui grande importância no Estado de Mato Grosso, pois mais de um terço da população está localizada em sua área de drenagem, onde 46 % das fontes de captação de água para consumo doméstico dos diversos municípios da bacia provêm desse rio. Com o crescimento populacional na região de Cuiabá ocorreu a deterioração da qualidade da água dos Rios Cuiabá e Coxipó (afluente Rio Cuiabá), uma vez que os cursos de água são usados também como local de diluição dos efluentes doméstico e industrial. Assim, é hipótese desse trabalho que o depósito de efluentes no Rio Cuiabá, além de influenciar na fauna e flora, também interfere na microbiota. Para testar esta hipótese, o presente trabalho tem como objetivos: isolar e quantificar microrganismos heterotróficos aeróbios totais cultiváveis e bactérias fixadoras de nitrogênio em amostras de água de oito (8) pontos amostrais do Rio Cuiabá; e caracterizar genotipicamente os isolados por meio do BOX-PCR. Foram realizadas seis (6) coletas bimestralmente no período de um (1) ano. As amostras foram inoculadas em placas contendo quatro (4) meios de culturas (TSA para heterotróficos totais, e NFb, Meio 79 e JMV para os grupos específicos de nitrificantes) e incubadas a 35º C por 144 horas, sendo realizadas leituras a cada 24 horas, para contagem das Unidades Formadoras de Colônia (UFCs). Verificou-se diferença na contagem de UFC entre os pontos amostrados. No cultivo em TSA, os pontos P4 e P6 foram os que apresentaram valores mais elevados, na ordem de 5,5×105 mL-1 e 1,1x106mL-1, respectivamente. As amostras de P2 e P3 apresentaram os menores valores de contagem. 9,1×103 mL-1 e 3,6x103mL-1, respectivamente. As nitrificantes apresentaram comportamento semelhante, com algumas exceções em alguns pontos que não são muito abundantes de heterotróficos totais, mas têm grande quantidade de bactérias dos grupos específicos. É perceptível também a diferença entre períodos sazonais, de forma que as primeiras coletas realizadas no início do período chuvoso apresentaram maior abundância que as últimas coletas que caracterizam o período seco. Foram isolados quatrocentos e sessenta e seis (466) estirpes bacterianas dos 4 meios de cultura. Na análise morfotintorial de Gram verificou-seque 8,16% das bactérias identificadas são Cocos Gram Positivos; 9,01% são Cocos Gram Negativos; 36,48% são Bastonetes Gram Positivos; e 46,35% são Bastonetes Gram Negativos. Foi extraído e amplificado por meio da técnica PCR o DNA de 105 cepas isoladas. Na análise genotípica por BOX-PCR, verificou-se que existe uma maior similaridade entre as estirpes isoladas dos mesmos meios de cultura, e uma maior diversidade de perfis genéticos no trecho inicial do rio (P1, P2 e P3). Já no trecho intermediário que caracteriza o perímetro urbano (P4, P5 e P6), apresentou variabilidade inferior, e no trecho final (P7 e P8), a diversidade de microrganismos foi menor que no trecho inicial.

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